细胞培养氨基酸稳定同位素标记(Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture, SILAC),是2002年丹麦Mann实验室对AACT技术作进一步改进而获得,并开始应用于定量蛋白质组学研究,为全面、系统地定性和定量分析复杂哺乳动物细胞蛋白质组提供有效的解决方案。该方案的技术优势体现在:
▶ 采用高分辨率质谱定量技术,定量结果准确且批次变异小、重复性好;
▶ Silac标记是在样品处理前引入,随后进行蛋白质分离、酶切和鉴定,后续实验对样品的影响一致,误差减少;
▶ Silac与SDS-PAGE或色谱分离技术相结合,兼容疏水性蛋白和偏碱性蛋白,不受蛋白质性质影响;
▶ Silac属于体内标记,标记效率高且稳定,不仅适合于进行全细胞蛋白质的分析,还适合于膜蛋白的鉴定和定量