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甲基和氨基酸类型标记
来源: | 作者:food-100 | 发布时间: 2022-07-18 | 411 次浏览 | 分享到:

甲基标记是指将13CH3或13CHD2基团引入均匀氘化蛋白质的方法。这可以在原核和真核表达系统中通过在蛋白质诱导之前直接向细胞培养基中添加氨基酸（足量）来实现。对于大肠杆菌培养物，可通过在诱导前1小时向D2O基细胞培养基中添加α-酮酸前体来实现ILV甲基上的选择性质子化。α-酮异丁酸转化为异亮氨酸，α-酮异戊酸转化为亮氨酸和缬氨酸。当使用甲基特洛伊技术时，这种方法极大地增加了NMR可评估的蛋白质和蛋白质复合物的有用分子量范围。